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藥廠設計之植物細胞培養(yǎng)生產(chǎn)天然藥物的方法

文章來源 藥廠設計公司 作者:制藥廠房設計公司 時間:2020-02-07 16:48

下面筆者談下藥廠設計之植物細胞培養(yǎng)生產(chǎn)天然藥物的方法。植物細胞培養(yǎng)是生產(chǎn)天然藥物的一種重要方法,這些藥物大多是植物細胞的次級代謝物,植物細胞培養(yǎng)生產(chǎn)次級代謝物的基本過程如下。

1、外植體的選擇與處理

外植體是指從植株中取出,經(jīng)過預處理后,用于植物組織、細胞培養(yǎng)的植物組織(包括根、莖、葉、芽、花、果實、種子等)的片斷或小塊。一般的處理方法是:將其切成0.51cm的片斷或小塊,用70%~75%的乙醇溶液或者5%的次氯酸鈉、10%的漂白粉、0.1%的升汞溶液等進行消毒處理,再用無菌水充分漂洗,以除去殘留的消毒劑。

2、植物細胞的獲得

從外植體獲得植物細胞的方法主要有三種,即外植體直接分離法、愈傷組織分離法和原生質(zhì)體再生法。

3、植物細胞擴大培養(yǎng)

將上述方法獲得的植物細胞在生長培養(yǎng)基中擴大培養(yǎng),以獲得足夠數(shù)量的優(yōu)質(zhì)細胞。如果獲得的細胞不夠理想,還可以通過篩選、誘變、原生質(zhì)體融合或基因重組等方法進行細胞改良,再進行細胞擴大培養(yǎng)。

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4、植物細胞懸浮培養(yǎng)或固定化培養(yǎng)

獲得足夠量植物細胞以后,就可以進行細胞懸浮培養(yǎng)。植物細胞懸浮培養(yǎng)是指植物細胞(主要是小細胞團)懸浮于液體培養(yǎng)基中,在人工控制的生物反應器中生長、繁殖和新陳代謝的過程。在生物反應器中進行大規(guī)模植物細胞懸浮培養(yǎng)的方式主要有分批培養(yǎng)、半連續(xù)培養(yǎng)、連續(xù)培養(yǎng)和兩相培養(yǎng)等。也可進行固定化培養(yǎng),即與固定化酶或固定化微生物細胞類似將植物細胞固定(或包埋)于海藻酸鹽和卡拉膠等載體中。

5、目標次級代謝物的分離純化

細胞培養(yǎng)完成后,如果目標次級代謝產(chǎn)物存在于細胞外,則可直接根據(jù)次級代謝物的分布情況,分別收集細胞或者培養(yǎng)液,在兩相培養(yǎng)中則收集所使用的有機溶劑或者高分子聚合物等,再采用各種純化分離技術(shù)進行分離、純化,得到所需的各種次級代謝產(chǎn)物。如果次級代謝物存在于細胞內(nèi),則要經(jīng)過細胞破碎,然后再進行提取和分離純化。植物細胞次級代謝物的分離純化方法,常用的有沉淀分離、膜分離和結(jié)晶等。

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